标准PCR实验室 洁净实验室建设方案

中净环球净化科技有限公司提供PCR实验室、基因扩增实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
  PCR检验试剂的准备—样品的制备—核酸或蛋白等目标物质的提取—PCR扩增实验—产物分析电泳、凝胶成像等或者荧光定量—结果判定—结果表达，出具检验报告。若采用“一步法”核酸提取技术，可在常温下快速裂解病原体，*加热煮沸和换管，通过简单的操作即可实现样本核酸的快速提取；若采用荧光定量PCR，则扩增和产物分析在同一个步骤中进行。
  实验室的整体设计和运作直接影响到检测结果的准确度、稳定性和生物等。PCR实验室整体解决方案包括规划设计管理、仪器试剂配套、技术服务支持、人员培训等多个方面，是一体化、多元化的系统解决方案。
  PCR实验室建设：
  1.主体结构：
  主体为彩钢板、铝合金型材；室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决*污染、积尘、不易清扫等问题；结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。
   2.标准的三区分隔和气压调节：
  将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增、分析三个（或）四个立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个立实验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。
  3.消毒：
  在三个实验区和三个缓冲区**部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。在试剂准备区和标本制备区 还设置移动紫外线灯，对实验桌进行局部消毒。
  4.机械连锁不锈钢传递窗：
  试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。
  5.地面
  地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面，整体性好，便于进行清扫，耐腐蚀。     
  6.照明
  灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。

中净环球净化科技有限公司可提供PCR实验室、核酸检测实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
  实验室自配试剂去离子水、缓冲液等和所有使用器具在使用之前均应高压灭菌或紫外杀菌；尖、反应管等实验耗材应一次性使用。实验应在**净工作台内进行，工作台内应放置PCR的微量离心机、各量程的移液器和其他物品；实验的过程中选择合适尺寸的手套并能及时换，在进出不同实验区域或进行模板操作后都应换实验服、口罩、帽子及手套，以避免不同实验区交叉污染；吸加试剂和模板的操作应严格按照规范要求进行，遵守“慢吸快打”原则，尽量一次性完成，忌多次抽吸，以避免气溶胶产生的交叉污染；装有PCR试剂的反应管在打开之前应先瞬时离心，将管壁及管盖上的液体离至管底，降低污染手套或加样器的风险；谨慎开启反应管，防止管内液体溅出或形成气溶胶导致污染。
  PCR试剂建议小量分装，以减少反复冻融、重复取样次数；多样本PCR反应时，先配制反应混合液分装至反应管中，后加入样本核酸，请勿同时开盖，尽量保证单人单管，实现完全闭管操作；实验试剂应与样品和PCR产物分开保存，不应放于同处；PCR扩增实验完成后及时将反应管取出，用一次性手套将产物反应管包裹丢弃，保证管盖紧闭。
  PCR实验室的污染应急处理方法：暂停所有实验操作；清理实验室内所有物品，寻找污染来源；加大实验室的通风；对实验室内所有表面台面、地面及墙面进行消毒；75%酒精空中喷雾；开启紫外消毒装置，延长紫外照射时间4小时以上；以上措施每日进行，直至污染*；用新试剂及确认无污染的器材进行原污染项目的试剂空白检测，连续3次均阴性后方可进行常规检测。

中净环球净化科技有限公司可提供PCR检测实验室、核酸检测检验实验室、微生物实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务，技术专业、经验丰富、价格实惠。   
  试剂配制室及样品处理室宜呈微正压，以防外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污染；可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。核酸扩增室及产物分析室应呈微负压，以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品，可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。PCR实验室缓冲间内，可设置正压，使室内空气不流向室外，室外空气不流向室内；PCR实验室进风由原有中央空调控制，要求将中央空调风口安装到**，且高度为地面铺装好后2600mm处。
  各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、与气流，形成单向流程的保护屏障，避免实验之间的相互干扰，防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。实验室的墙体，包括顶棚，应结构牢固、气密性好；所有阴角宜采用圆弧形线条过渡；墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒；地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
  PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中，常见的有以下几种污染类型：扩增产物的污染；**基因组DNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染，实验就停止，直到找到污染源为止，而且实验结果作废，需重新进行实验；所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐，浪费人力物力；因此要避免污染，首先应是预防，而不是排除。
  严格控制进出实验室的人员，与实验无关的人员不得随意进出实验室，有条件的情况下要设置立的通道和进出整个实验区的门；尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性；扩增产物分析区是主要的扩增产物污染来源，废液不能在实验室中倾倒，经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉，用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理，如焚烧等。

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  由于PCR实验室在加样操作过程中可能产生气溶胶，为避免气溶胶扩散出去对外界造成污染，同时为了避免各房间之间通过风管系统交叉污染，实验室建议采用全新风系统；新风经热湿处理及初效、中效、或亚过滤后送入室内;各房间排风口单设置或亚过滤器。当房间无工艺设备排风时，可通过换气次数，工艺操作间换气次数为12~15次/h，缓冲间6~8次/h，计算得出房间送风量，然后根据缝隙法得出房间排风量;当房间有工艺设备如生物柜排风时，比较设备排风量与满足换气次数所需送风量，取两者之间的较大值，一般情况下，设备排风量较大，然后可根据缝隙法得出房间送风量。
  气流组织上，PCR实验室空调系统通常采用上送下排式的非单向流送风方式。房间上部送风口尽量均匀布置，且与生物柜操作面或其他有气溶胶操作地点的正上方保持一定距离;房间下部利用室内排风夹道上设置的排风口排风，排风口底部距地面0.1m，排风夹道需设置于室内被污染风险的区域，排风口前面不应有障碍物遮挡。
  PCR实验室内通常有生物柜、通风柜等生产设备，这类设备排风量大且使用时间有间隔性，并不与空调系统运行时间一致，这就导致有这些设备的房间在设备启停的时候很*失压，原本正常的压力梯度瞬间就破坏了。这正是PCR实验室空调系统设计的难点所在。温湿度控制：夏季调节表冷盘管动态压差平衡调节阀的开度以控制室内温湿度，湿度**;当为了调节室内湿度而造成温度过低时，开启加热盘管以控制室内温度；冬季调节加热盘管动态压差平衡电动调节阀的开度以控制室内温度，调节加湿器的开度以控制湿度。
  压力及变频控制：在空调系统各房间送风支管上设置压力无关型定风量阀，无工艺设备排风房间的排风支管上设置压力无关型定风量阀，从而恒定房间的风量以控制房间压力；在有工艺设备排风房间的排风支管上设变风量阀，根据房间内压差动作，以控制房间压力；需排风的工艺设备如生物柜排风支管上设变风量阀，根据设备开启度调节设备排风量。
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