中净环球净化科技有限公司可提供PCR实验室、核酸检测实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
如何建一个标准的PCR 实验室?PCR实验室如何设计规划才堪称?PCR实验室管理又有哪些注意要点?本文让你从0开始搞懂PCR实验室规划设计。
标准的PCR 实验室分为四个区域,分别为:
n1.试剂配制区;
n2.样品处理区;
n3.核酸扩增区;
n4.产物分析区;
如使用全自动分析仪,区域可适当合并。(进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服,例如不同的颜色。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出)
PCR实验室平面布局
【各区的功能分别为】
试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。
样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存和加样。
扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间有一定的间隔。
使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内:
在生物*柜内操作;
每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材;
盛放污染材料的器皿密封并一次性使用;
用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。
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送风末端装置的安装
1.送风末端过滤器或送风末端装置应在系统新风过滤器与系统中作为末端过滤器的预过滤器安装完毕并可运行、对洁净室空调设备安装空间和风管进行*清洁、对风管空吹12h之后安装。
2.系统空吹时,宜关闭新风口采用循环风,并在回风口设置相当于中效过滤器的预过滤装置,全风量空吹完毕后撤走。
3.空吹完毕后应再次清扫、擦净洁净室,然后立即安装亚过滤器或过滤器或带此种过滤器的送风末端装置。
4.安装前的送风末端过滤器或其送风末端装置应存放在干净的室内,并应按生产厂的标志方向搁置,叠放不应多于三层。
5.送风末端过滤器或其送风末端装置不得在安装前拆下包装。拆下包装后,先应进行下列检查:
1应检查产品合格证、出厂检验报告,其中应有效率、阻力和扫描检漏的实测数据,不得以过滤器所属类别定义数据代替。
2应进行外观检查,内容应包括有无损坏;各种尺寸是否符合设计要求;框架有无毛刺和锈斑(金属框);带风机的风机安装是否可靠,转动是否正常;带装饰网或阻漏层的,装饰网或阻漏层是否完好、绷紧。
6.送风末端过滤器安装前,应再次检查承载过滤器的框架开口尺寸,开口尺寸不得大于送风末端过滤器的边框内净尺寸。
7.用于以过滤生物气溶胶为主要目的、5级或5级以上洁净室或者有专门要求的送风末端过滤器或其末端装置安装后,应逐台进行现场扫描检漏,并应合格。
8.5级以下以过滤非生物气溶胶为主要目的的洁净室的送风过滤器或其末端装置安装后应现场进行扫描检漏,检漏比例不应低于25%。扫描过滤器现场检漏方法可按附录E的方法执行。
9.送风末端过滤器和框架之间采用密封垫密封、负压密封、液槽密封、双环密封和动态气流密封等方法时,都应将填料表面、过滤器边框表面和框架表面及液槽擦拭干净。不得在过滤器边框与框架之间直接涂胶密封。
10.采用密封垫时,压缩率宜为25%~30%,不得将密封垫压死。密封垫材质和接头形式应符合本规范*5.3.2~5.3.3条的规定。当用螺栓、压块压紧密封垫时,四角应压紧,不得只压边框中点。当过滤器边框长度尺寸大于320mm时,应至少采用四角8点压紧。
11.采用液槽密封时,液槽内的液面高度应符合设计要求或不**过槽深2/3,框架各接缝处不得有渗液现象;采用双环密封条时,粘贴密封条时不应把环腔上的孔眼堵住;双环密封、负压密封、动态气流密封都应保持负压或正压管、槽畅通;采用阻漏层和风机过滤器单元(FFU)时,边框不应用胶封,应设柔软隔层使其处于自然压紧状态。
12.安装送风末端过滤器时,外框上箭头和气流方向须一致,当其垂直安装(包括码放)时,滤纸折痕缝应垂直于地面。
13.和亚过滤器安装过程中,室内不得进行带尘、产尘作业,安装完后应用塑料薄膜将出风面封住,暂时不上扩散板等装饰件。
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进入各工作区域应当严格按照单一方向进行,即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区;各工作区域必须有明确的标记,不同工作区域内的设备、物品不得混用;不同的工作区域使用不同的工作服例如不同的颜色;工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出;实验室的清洁应当按试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区的方向进行,不同的实验区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污染;工作结束后,必须立即对工作区进行清洁,实验台表面的紫外照射应当方便有效可移动紫外灯,254nm波长,在工作完成后调至实验台上60~90cm内照射。
试剂盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在试剂储存和准备区 ,应当保存在标本处理区;由于在样本混合、核酸纯化过程中可能会发生气溶胶所致的污染,可通过在标本制备区内设立正压条件,避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,为避免样本间的交叉污染,加入待测核酸后,必须盖好含反应混合液的反应管;必须注意的是所有经过检测的反应管不得在扩增区打开;须注意避免通过扩增产物分析区的物品及工作服将扩增产物带出。
完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件,应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如**净工作台、离心机、加样器等。
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基因扩增实验室布局形式:
功能区呈现分散形式:这种实验室往往都是由于场地受限,不得不将各个功能区分散于不同的建筑物或者同一建筑物的不同位置,各功能区之间没有相邻,互不干扰,对于这种的基因扩增实验室一般来说没有特定的要求。但由于这种功能间之间的分散性给实验人员带来诸多不便,所以在新建的基因扩增实验室往往不采用这种这种形式。
组合形式基因扩增实验室:组合形式基因扩增实验室是目前为常见的新增基因扩增实验室的建设形式,由于建设所提供的空间比较大,可以将各功能区实验用房能够依次相邻划分,形成一个组合形式完成基因扩增分析的基因扩增实验室,各个功能区的实验室在空间分布上各自立,互不干扰,彼此之间除了传递窗不存在任何交互;但是由于这些功能间一个区域范围内,所以对于组合形式基因扩增实验室必须提供**的屏障系统,各室在处设缓冲间,以减少室内外空气交换,同时也要考虑整个实验室的路线、物流路线以及消防路线等,另外也要对实验室的空调通风系统、气流流向、大气压以及装修材料等提出了一定的要求;工作区域及各区域所用的仪器设备必须有明确的标记,避免不同工作区域内的设备、物品混用;各区域实验台表面应可耐受次氯酸钠、双氧水等化学物质及紫外线的消毒清洁作用。
生物*柜的摆放位置不易摆放在与出紧邻的墙体上;实验室内的通讯设施应该放置于生物*柜对面;实验室门口位置设置紧急洗眼器和紧急喷淋,以防止实验人员受到伤害;高压灭菌器应与传递窗紧邻;实验室内的压力显示器和报警装置都应放置在醒目位置;与室外联系的电话应放置在醒目位置,并且放置在便于实验室人员快速拿起的位置;实验室应该具有防止昆虫和其他动物进入的措施。
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