无菌实验动物房建造

中净环球净化可提供动物房，动物实验室，动物洁净室，动物无菌室的咨询、规划、设计、施工、安装改造等配套服务。 浅析实验动物房的工程设计（二）
具体布局
3.1 单走廊模式的实验动物房
3.1.1 单走廊模式的实验动物房布局 
单走廊模式的动物房是人员、物品、动物、笼具共用一条走廊，布局简洁、流线明确，大大减少了所 需通道的面积，使得房间的可用面积变大，节约运行成本。
单走廊模式的实验动物房布局如图1所示，包括人员的进出流线、动物进入的流线、物品（如饲料、垫料、笼具）的进出流线、废弃物品的退出流线。 
由于单侧走廊的动物房设置所有的实验操作间的 门均是开向走廊，因此走廊上汇集了所有的人员、 物品、动物、笼具的进出流线，导致清洗前后的笼具均由同一走廊传送。
单走廊模式**的优点：
提高空间利用率， 并且将车间的面积尽可能利用布置为房间，使得建 造成本降低。
单走廊模式的缺点：
各种流向在一条走廊上， 需要通过日常的严格来尽量避免交叉污染。
目前，这种单走廊形式适用于动物饲养规模较小和普 通环境要求下的动物实验房。
3.1.2 单走廊模式的实验动物房压差
以正压屏障环境下的单走廊模式为例，需要保证动物的生产区、动物实验区压力。也就是说， 房间压力**走廊，气流由房间流向走廊，保证房间不受影响。
3.2 双走廊模式的实验动物房
3.2.1 双走廊模式的实验动物房布局 
双走廊或多走廊的实验动物房是人员、物品、动物、笼具先通过洁净走廊进入，再从污物走廊退出。其流线明确，减少了交叉污染。
由于双走廊模式的动物房设置所有的实验操 作间的门均是开向两侧的走廊，因此洁净走廊上主要是人员、物品、动物、笼具的进入流线，而退出的人员、物品、废弃物等从污物走廊退出。流线区分明确，可程度地避免交叉污染。
双走廊模式**的优点：减少交叉污染，流 线清晰，易于管理，便于通过设计认证。
双走廊模式的缺点：与单走廊模式相比，浪费 厂房面积。
为了提高面积的使用率，可以将双走廊 模式的动物房设置为中间洁净、两侧污染的三走廊 模式。
目前这种形式适用于各种SPF的小鼠和 的动物实验房。
3.2.2 双走廊模式的实验动物房压差 
以正压屏障环境下的双走廊模式为例，需要保证洁净走廊的压力**动物生产区、实验区的压 力；动物生产区、实验区的压力**污物走廊。也就 是说，压力从高到低，气流由洁净走廊流向房间，再由房间流向污物走廊。
实验动物房的工程设计要点
4.1 建筑材料
实验动物房的建筑墙板和顶棚的材料，可采用 铝蜂窝的夹心彩钢板，圆弧角采用铝合金材质制成。地面采用PVC材质，耐酸碱，受损后易于修补。
4.2 空调系统 
为了**实验动物房的洁净环境，实验动物房 的空调系统采用初、中、过滤模式。
换气次数根据实验室面积、高度和内部发热情况，通过空 调的送风和排风实现。由于实验动物房是全空气系 统，因此房间大小合理、紧凑即可，并设计合适的换 气次数以保证洁净级别要求。另外，空调系统尽量考虑房间的四个角同时回风，以保证内部气流的均 匀。对于全空气系统，采用能量回收装置，基本可以 收回50%～60%的能量。
4.3 自控和报警系统 
为了确保房间的温湿度、压力和换气次数符合 要求，需要对关键房间进行，并自动采集、记录、存储数据等，如果指标不符合要求，则需要报警 提示 。
3 结语
实验动物房在设计建造过程中应综合考虑各种因素对实验动物的影响。
（1）在满足生产使用部门 需求的同时，结合工程建设的特点综合分析。
（2）实验动物房在建设时，要满足各种规范要求，选择适 合的工艺布局形式，严格控制人员、物品和动物等流向，避免交叉污染，确保动物房建设完成后顺利 通过认证。
（3）从节约建设成本和运行成本的角度， 严格把控施工材料质量。

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构建动物细胞培养室和植物细胞培养实验室（二）
实验室内，还会有以下常用的基本设备。
I.仪器：
1）显微镜:倒置显微镜是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一，便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。
2）培养箱：体外培养的细胞和体内细胞一样，需要在恒定的温度下生存，大多数情况下，适温度是 37'℃,温差变化一般不应**过±0.5'℃,细胞在温度升高 2^C时，持续数小时即不能耐受，40°℃ 以上捋很快。因此需要有能控制温度的培养箱，如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO₂培养箱。
3）干燥箱:川于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，电热干燥箱升温较高，一般需达到 160°c 以上。通常使用鼓风式电热干燥箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至 10（TC时，停止鼓风，应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后，不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏，应等候温度自然下降至 100°c以下方可开门。
4）水纯化装置:细胞培养对水的质量要求较高，细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。水纯化时可采用离子交换装贾或蒸馏器。离子交换纯水尚不能有效去除**物，因此用水时尚需冉次蒸馏。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水：即使是用于玻璃器皿的冲洗，也应使用二次以上蒸馏水。
5）冰箱：细胞培养室必须配备。
普通冰箱或冷藏杞
储存培养液、生理盐水、Hank’s液试剂等培养用的物品及短期保存组织标本
低温冰箱(-20 °c)、温冰箱
用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂，如酶、血清等。
细胞培养室的冰箱应属，不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质，且应保持清洁。
6）细胞冷冻储存器：储存器常用的是液氮界器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小，取放使用方便及液氮挥发量(经济)三种因素。液氮界器的大小可自25L～500L,可以储存1m1的安甑250～15000个左右液氮温度可低达-196℃,使用时应防止冻伤。由于液氮不断挥发，应注意观察存留液氮情况，及时定期补充液氮，避免挥发过多而致细胞受损。
7）离心机：进行细胞培养时，常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作，通常需要使用离心机。
一般可常规配置 4000rpni 的国产台式离心机，例如细胞沉降，使用 80～100g的离心机即可，离心力过大有时可能引起细胞的损伤。
另外，可根据需要添置其他类型如大容显或可调节温度的离心机等。
若需用途，例如某些细胞的分离制备需梯度离心，则需另行配置实验所需的具备其他功能的离心机。
8）天平：常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。
分析大下的感;W:为 0.1mg、0.01mg和10.001mg。根据称取物质的;W:和称精度的要求，选择适宜级别的天平。要求精密称定时，当取样量大于 100mg 选用感量为 0. 1mg 天平，在 100— 10mg选用感量为 0.01mg 天平，小于10mg选用感量为 0.001mg 天平。
9)消毒器：直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。
10）滤器：目前细胞培养工作中采用的培养用液，包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质，这些物质在商温或射线照射下易发生变性或失去功能，因而上述液体多朵用滤过沙毒以除去细胞。

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构建动物细胞培养室和植物细胞培养实验室（一）
细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。H前，**净工作台的广泛使用，很大程度上方便了组织细胞培养工作，并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。
细胞培养实验室应能进行大方面的工作：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒火菌处理、储藏。
因此，无论是动物细胞培养室还是植物细胞培养实验室，必定有一下儿种房间。
1.涤问：根据工作量的大小决定其大小。在实验室的一侧设置的洗涤水槽，用来清洗玻璃器皿。实验台还应配置水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大，可以购置一台洗瓶机。准备洗液缸，用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。地面应耐湿并排水良好。
2.培养基配制间：配备的主要仪器设备有：冰箱、天平、微波炉、pH 计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、简、容量瓶、储藏瓶等。
3.滑毒间：配备实验台、高压火菌锅、排风火火设备、过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的手提式简压灭菌锅，较大的实验室可选用立式向动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭饱锅。如果没有条件的话，可以将上述工作间合并成一个准备间，要求是设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风，地面要便于清洁、防滑。
4.无菌操作室：无菌操作室主要川于实验材料的接种操作，所以又叫接种室。通常由里外两间组成，外间是缓冲间，用于准备工作，还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲问闪应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修，工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。室内应配有**净工作台，紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。
5.培养室。

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动物二级生物*实验室
动物生物*实验室比生物*实验室要复杂得多，涉及的活动包括动物饲养和实验，关注的焦点包括动物的质量和福利需求、实验室的生物*、职业健康和环境*，实验室“三废”的处理也更为复杂，同时要考虑*动物饲养、实验和消毒过程中产生的异味。
现行国家标准《实验室 生物*通用要求》GB 19489规定了动物生物*实验室的基本分级，但要注意，实验室在从事相关活动时，应依据国家相关主管部门发布的病原微生物分类名录，在风险评估的基础上，确定实验室的生物*防护水平。动物二级生物*实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严病，并且具备有效和预防措施的病原微生物。
动物生物*实验室的生物*防护设施还应考虑对动物呼吸、排泄、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验（如染毒、检查、取样、解剖、检验等）、动物饲养、动物尸体及排泄物的处置等过程产生的潜在生物危险的防护。应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目的等选择具有适当防护水平的、适用于动物的饲养设施、实验设施、消毒灭菌设施和清洗设施等。实验动物设施不得循环使用动物生物*实验室内排出的空气。
动物生物*实验室的设计，如空间、进出通道、解剖室、笼具等应考虑动物实验及动物福利的要求，符合国家实验动物饲养设施标准的要求。
适用于动物二级生物*实验室的标准至少包括：《实验室 生物*通用要求》GB 19489；《生物*实验室建筑技术规范》GB 50346；《移动式实验室 生物*要求》GB 27421；《实验动物 环境及设施》GB 14925；《实验动物设施建筑技术规范》GB 50447；《实验动物机构 质量和能力的通用要求》GB/T 27416；《病原微生物实验室生物*通用准则》WS 233；《兽医实验室生物*要求通则》NY/T 1948。
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