东莞无菌室动物实验室建设

中净环球净化可提供动物房，动物实验室，动物洁净室，动物无菌室的咨询、规划、设计、施工、安装改造等配套服务。
动物实验室平面布局设计
动物实验室一般由饲养室、健康观察室、隔离检疫室、各种实验室（手术、实验处理解剖、术后管理、疾病诊断、、生理生化检查、微生物检疫、饲料营养分析和饲料的调制室等），以及贮藏室、清洁准备室、洗涤室、工作人员用房（包括办公室、淋浴室、更衣室等）、走廊(清洁区和污染区)、废弃物处理设施、机房和变电所等组成。
动物实验室布置的关键在于人员、物品、动物以及污物进出不能相污染。布置实验动物房的原则是需设有人员进入时的净化更衣设施，物品进入时的设施，还要有外来动物进入的待检室、检疫室，以及动物尸体、污物运出的污物走廊和的污物暂存间。
清洁级实验动物房平面布置主要包括：人员换鞋、更衣、洗衣等净化设施；物品储存、、等准备设施；动物检疫、饲育、观察等实验设施；洁净走廊、污物走廊和污物间，以及办公、档案、配电等设施。
动物实验室建设管理区
人员、物品进入前的区域，包括动物检疫室、更衣室、传递窗等；清洗区：洗刷间，高压器设置在与物品存放间交接处，清洗池设置2个连排水槽，采用不锈钢制做，水池的内尺寸大小与甲方协商确定，洗刷间配备排风设施；实验区：动物饲养区域，包括物品存储室、走廊、动物饲养房、动物实验室等；机房：为动物房提供送风，安装直膨式组合空调机组、送排风管等；动物饲养房：在饲养房和兔饲养房内部安装摄像头，饲养房内工作照度与动物照度每隔12小时自动切换。

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构建动物细胞培养室和植物细胞培养实验室（二）
实验室内，还会有以下常用的基本设备。
I.仪器：
1）显微镜:倒置显微镜是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一，便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。
2）培养箱：体外培养的细胞和体内细胞一样，需要在恒定的温度下生存，大多数情况下，适温度是 37'℃,温差变化一般不应**过±0.5'℃,细胞在温度升高 2^C时，持续数小时即不能耐受，40°℃ 以上捋很快。因此需要有能控制温度的培养箱，如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO₂培养箱。
3）干燥箱:川于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，电热干燥箱升温较高，一般需达到 160°c 以上。通常使用鼓风式电热干燥箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至 10（TC时，停止鼓风，应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后，不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏，应等候温度自然下降至 100°c以下方可开门。
4）水纯化装置:细胞培养对水的质量要求较高，细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。水纯化时可采用离子交换装贾或蒸馏器。离子交换纯水尚不能有效去除**物，因此用水时尚需冉次蒸馏。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水：即使是用于玻璃器皿的冲洗，也应使用二次以上蒸馏水。
5）冰箱：细胞培养室必须配备。
普通冰箱或冷藏杞
储存培养液、生理盐水、Hank’s液试剂等培养用的物品及短期保存组织标本
低温冰箱(-20 °c)、温冰箱
用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂，如酶、血清等。
细胞培养室的冰箱应属，不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质，且应保持清洁。
6）细胞冷冻储存器：储存器常用的是液氮界器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小，取放使用方便及液氮挥发量(经济)三种因素。液氮界器的大小可自25L～500L,可以储存1m1的安甑250～15000个左右液氮温度可低达-196℃,使用时应防止冻伤。由于液氮不断挥发，应注意观察存留液氮情况，及时定期补充液氮，避免挥发过多而致细胞受损。
7）离心机：进行细胞培养时，常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作，通常需要使用离心机。
一般可常规配置 4000rpni 的国产台式离心机，例如细胞沉降，使用 80～100g的离心机即可，离心力过大有时可能引起细胞的损伤。
另外，可根据需要添置其他类型如大容显或可调节温度的离心机等。
若需用途，例如某些细胞的分离制备需梯度离心，则需另行配置实验所需的具备其他功能的离心机。
8）天平：常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。
分析大下的感;W:为 0.1mg、0.01mg和10.001mg。根据称取物质的;W:和称精度的要求，选择适宜级别的天平。要求精密称定时，当取样量大于 100mg 选用感量为 0. 1mg 天平，在 100— 10mg选用感量为 0.01mg 天平，小于10mg选用感量为 0.001mg 天平。
9)消毒器：直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。
10）滤器：目前细胞培养工作中采用的培养用液，包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质，这些物质在商温或射线照射下易发生变性或失去功能，因而上述液体多朵用滤过沙毒以除去细胞。

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实验室生物*防护的基本原则：
*设备和个体防护；实验室设计与建造的要求；
*操作规程；致病微生物及其在实验室之间的传递；
管理制度；微生物危害评估。
实验室内务管理：
1）有内务管理的政策和程序，包括内务工作所用清洁剂和消毒灭菌剂的选择、配制、效期、使用方法、有效成分检测及消毒灭菌效果监测等政策和程序，应评估和避免消毒灭菌剂本身的风险。
2）不应在工作面放置过多的实验室耗材。
3）应时刻保持工作区整洁有序。
4）应专人使用经核准的方法和个体防护装备进行内务工作。
5）不应混用不同风险区的内务程序和装备。
6）应在*处置后对被污染的区域和可能被污染的区域进行内务工作。
7）应制定日常清洁计划和清场消毒灭菌计划，实验室设备，工作表面。
8）专人监督内务工作，定期评价。
9）实验室的内务规程和所用材料发生改变时通知实验室负责人。
10）实验室规程、工作习惯或材料的改变可能对内务人员有潜在危险时，通知实验室负责人并书面告知内务管理负责人。
11）发生危险材料溢洒时，启用应急处理程序。
12) 相关记录*保存。
实验室操作与技术：
工作时进出受约束或受限制；禁止吃、喝、吸烟；禁止用口移液；将溅洒和气溶胶减到少；每天对工作面消毒；将废物消毒；保持对昆虫和啮齿类动物的控制。
入实验室：门禁，更衣，填写准出入实验室表。
查看实验室：仪器，试剂，标本，填写使用记录。
操作：防漏，防气溶胶，自身保护，遵守SOP。
废弃物处理：废物桶，废物袋，高压（指示物），登记。
出实验室：更衣，清洁，消毒，填写出入实验室表。
标识系统：
设置原则：*、明确、醒目、便利、通用。
标识系统分类：警告标识、禁止标识、指令标识、提示标识。

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动物实验室级别及检查标准
1.1动物实验室级别
一级普通动物（CV），系指微生物不受控制的一般动物。要求排除共患病的病原体和少数的实验动物烈的病原体。为防止病，在实验动物饲养和繁殖时，要采取一定的措施，应保证其用于测试的结果具有反应的重现性（即无论不同的操作人员，在不同的时间，用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验，都能获得几乎相同的结果。
二级清洁动物（CL），要求排除共患病及动物主要病的病原体。
无病原体动物（SPF），要求到二级外，还要排除一些规定的病原体。其与的方法，可使用空气过滤器法、紫外线法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。
无菌动物（GF）或栖生动物（GN），无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。栖生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知微生物。
1.2四类实验动物的病理检查标准
在病理学检查上，四类实验动物也有不同的病理检查标准。
一级外观健康，主要不应有病灶。
二级除一级指标外，显微镜检查**级微生物病原的病变。 
无病原体动物，**、微生物病原的病变。
不含二、微生物病原的病变，脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。
1.3动物实验室建设的要求
对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。
无菌、已知菌以及无病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养，这种环境，目前国际上通用称为屏障环境，即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开，如胎鼠在母鼠内一样。
这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等类。
A隔离系统：是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统，用于饲养无菌动物和栖生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度，但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。
B屏障系统：把10000～100000级左右的无菌洁净室作为饲养室，主要用于无病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理，如淋浴、换贴身衣服等。
C半屏障系统：放宽对屏障系统中人及物出入房间时的管理，平面组成大致与屏障系统相同。
D层流架系统：笼具放在洁净的水平层流空气中。常用于小规模饲养，但在一般房间进行饲养、操作和处理时有被污染的危险性。可用于半屏障的补充。
E开放系统是对人、物、空气等进出房间均不施行污染的系统，但通常要进行某种程度的清洁管理。
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