PCR核酸检验实验室设计

中净环球净化科技有限公司可提供PCR实验室、基因扩增实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
排风系统一般有排风管道、消声器、风机、风阀、排风口、生物柜排风、通风橱排风、控制系统；对于临床基因扩增实验室，如果室内排除的气体没有腐蚀性，通风管道可以采用镀锌钢板，对于产生腐蚀性气体的实验室，风管应从耐腐蚀材料的PVC风管或玻璃钢风管，室外采用玻璃钢风管或镀锌板风管；圆形风管采用插接连接，矩形风管采用法兰方式连接，根据实际情况也可采用插件方式连接。
风机主要有轴流风机、斜流风机、离心风机；轴流风机适用于风压小、管路短的通风系统，如直接排至室外或窗外的通风系统；玻璃钢离心风机适用于管路长的通风系统，如通过风管井或外墙接管排至屋顶，风机的材质，一般分为玻璃钢、PP、PVC等，风机的型号根据风量和风压选择。
生物柜和通风橱有单独排风机可以独立排风，也可间内排风一起排至主管道，主管道设置主排风机经过处理后排至室外；排风口应设在室内被污染风险的区域，单侧布置，不得有障碍。排风口下边沿离地面不宜低于0.1m，且不应**0.15m；上边沿高度不宜**过地面之上0.6m，排风口排风速度一般不应大于1m/s；实验室的排风与送风联锁，排风先于送风开启，后于送风关闭；实验室设置室内排风口，不得只用柜或其他负压隔离装置作为房间排风口；操作过程中可能产生污染的设备设置局部负压排风装置，并带高效空气过滤器。生物柜生物柜是防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶的负压过滤排风柜，是防止实验室感染的主要设备。根据气流及隔离屏障设计结构，将生物柜分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级。Ⅱ级生物柜原理：生物柜是指用于保护操作人员、处理样品与环境的通风柜前窗操作口向内吸入的气流用以保护操作人员的；工作空间为经高效空气过滤器净化的垂直下降气流用以保护产品的；柜内的气流经高效空气过滤后排出，以保护环境不受污染。Ⅱ级生物柜按排放气流占系统总流量的比例及内部设计结构，将其划分为A1、A2、B1、B2四个类型。

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PCR检验试剂的准备—样品的制备—核酸或蛋白等目标物质的提取—PCR扩增实验—产物分析电泳、凝胶成像等或者荧光定量—结果判定—结果表达，出具检验报告。若采用“一步法”核酸提取技术，可在常温下快速裂解病原体，*加热煮沸和换管，通过简单的操作即可实现样本核酸的快速提取；若采用荧光定量PCR，则扩增和产物分析在同一个步骤中进行。
实验室的整体设计和运作直接影响到检测结果的准确度、稳定性和生物等。PCR实验室整体解决方案包括规划设计管理、仪器试剂配套、技术服务支持、人员专业培训等多个方面，是一体化、多元化的系统解决方案。
PCR实验室建设：
1.主体结构：
主体为彩钢板、铝合金型材；室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决*污染、积尘、不易清扫等问题；结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。
2.标准的三区分隔和气压调节：
将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增、分析三个（或）四个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。
3.消毒：
在三个实验区和三个缓冲区**部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。在试剂准备区和标本制备区 还设置移动紫外线灯，对实验桌进行局部消毒。
4.机械连锁不锈钢传递窗：
试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。
5.地面
地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面，整体性好，便于进行清扫，耐腐蚀。
6.照明
灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。

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临床基因扩增实验室和研究工作室的室内净高：当不设置空气调节时，建议不宜低于2.7m，一般为2.7m—2.9m；设置空气调节时，不应低于2.4m，一般为2.4m—2.6m。走道净高不应低于2.2m。临床基因扩增实验室各个房间的面积并没有严格要求，但是生物柜房间建议不能低于10平米，一般为15平米以上，并且每增加一台生物柜，房间建议增加10平米；样本间的面积相比其他房间要稍大一些。
临床基因扩增实验室外窗应具有良好的密闭性及隔热性，窗户的面积根据房间的尺寸来确定，底层、半地下室及地下室的外窗应采取防虫及防啮齿动物的措施。由一个标准单元组成的实验室的门洞宽度应为0.8—0.9m，高度不应小于2.10m；由一个及以上标准单元组成的实验室的门洞宽度不应小于1.2m，高度不应小于2.1m；有特殊要求的房间的门洞尺寸应按具体情况确定，实验室的门扇应设观察窗。实验室缓冲间的面积一般为1300*（1300或1500）mm为宜，并且缓冲间的面积不能大于实验室房间面积的1/8。
单面布房小净宽不应小于1.3m，单走道双面布房小净宽不应小于1.6m，走廊地面有高差时，当高差不足二级踏步时，不得设置台阶，应设坡道，其坡度不宜大于1：8。靠两侧墙布置的边实验台之间的净距不应小于1.5m，当靠一侧墙改为布置拒或实验仪器设备时，其与另一侧实验台之间的净距不应小于1.8m，由一个标准单元组成的常规实验室；靠两侧墙布置的边实验台与房间中间布置的岛式或半岛式实验台之间的净距不应小于1.5m；布置实验仪器设备时，其与实验台之间的净距不应小于1.8m，实验台的端部与走道墙之间的净距不宜小于1.2m。

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临床基因扩增实验又称 PCR实验，是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法，测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒；由于该检测方法可以测出普通检验难以检测出的病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点，因此被临床医生广为认可，已广泛应用于的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断；但是这种实验需要有能保证、配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。近年来对临床基因扩增检验实验室的建设越来越得到重视，因为它对检测结果的可靠性、准确性和性起到至关重要的作用。
临床基因扩增检验实验室设计的核心问题是如何避免污染，因此实验室的平面布局、空调通风系统设计、气流控制等都是围绕这个核心问题进行的。PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全排的气流组织形式，同时要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
标本污染主要有收集标本的容器被污染；标本存放运输时，由于密封不严或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；核酸模板在提取过程中，由于加样污染导致标本间污染；手动提取核酸样本时，污染的手套触摸离心管内盖导致的污染；有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。一个正规的实验室，要时刻注意监测实验室的污染情况。了解实验室有无污染，污染原因，污染程度，以便采取有效措施，防止和*污染，一般通过阴阳性对照检测污染情况。PCR阳性对照对于被建立PCR反应实验室及一般的检验单位都是必需设有的， PCR反应是否成功，PCR阳性对照是一个重要的参考标志；如果阴性对照和阳性对照均成立，说明质量控制成立，实验室未被污染，样本检测结果才有效；如果阴性对照不成立，出现扩增曲线，说明阴性对照被核酸污染，需要追溯污染源。