pcr扩增实验室 洁净实验室级别

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生物实验室化学淋浴消毒装置
1.概述
化学淋浴消毒装置是别生物实验室中一个关键的防护设备，适用于身着防护服的人员消毒，在人员离开高污染区防止可能产生的污染。《实验室  生物通用要求》GB 19489- 2008 中对化学淋浴系统做出了明确要求，其中*6.4.4条指出“适用于4.4.4的实验室防护区应包括防护走廊、内防护服换间、淋浴间、外防护服换间、化学淋浴间和核心工作间。化学淋浴间应为气锁，具备对正压防护服或传递物品的表面进行清洁和消毒灭菌的条件，具备使用生命支持供气系统的条件”。《生物实验室建筑技术规范》GB 50346- -2011 中也对化学淋浴间提出了一些具体要求。
化学淋浴消毒装置结构主要包括:水箱、两道互锁式气密门(常规为充气式气密门)、加药系统、喷淋系统、控制系统、送排风系统、排水系统及供气系统(提供给正压防护服)。化学淋浴消毒装置为立一套装置， 其给排水防回流措施、液位报警装置、箱体气密性、送/排风过滤器性能等由设备供应商确保质量符合标准要求。
化学淋浴是人员离开防护区和避免生物危险物质外泄的重要屏障，因此要求具有较高的可靠性，在化学淋浴系统中将化学药剂加压泵设计为一用一备是被广泛采用的提高系统可靠性的有效手段。在紧急情况下(包括化学淋浴系统失去电力供应的情况下)，可能来不及按标准程序进行化学淋浴或者化学淋浴发生严重故障丧失功能，因此要求设置紧急化学淋浴设备，这一系统应尽量简单可靠，在端情况下能够满足正压防护服表面消毒的要求。
2.设计和建设中应考虑的问题
对于化学淋浴消毒装置而言，生物实验室设计和建设时需要考虑的主要问题有:预留安装位置、与实验室围护结构的衔接、与实验室通风空调系统的衔接、与实验室供气系统的衔接、与实验室给水排水系统的衔接、预防箱体或阀门等漏水而设置围挡或地漏。
由于化学淋浴消毒装置的水箱、供水管、水阀等存在漏水的风险，故其安装位置应设置水围挡或地漏，确保漏出的水不会无组织流淌。若化学琳浴消毒装置水箱、供水管、水阀等安装在实验室所在楼层的上面一层(管道层)，即化学淋浴消毒装置水箱所在楼板为实验室防护区**板，不便于在其附近安装地漏(考虑围护结构气密性或防护区室内美观等因素)，此时应设置水围挡(堰)。

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  PCR实验室建设相关的文件主要有：《机构管理条例》、《机构实验室管理办法》、《基因扩增检验实验室管理暂行办法》、《机构基因扩增实验室管理办法》；要求PCR实验室，不但在实验室设置及仪器设备等硬件上要满足开展检验的条件，而且要求实验室在日常工作要有文件化的工作程序。
  根据实验室的具体情况编写质量体系文件，《质量手册》、《程序文件》、《作业书》，并保证管理体系运行有效；管理体系的特点是应有明确的目的、规范的管理、有效的制约、的机制、能自我发展的整体；明确每个环节转换过程中各项因素的要求，即由谁做、做什么、做到什么程序、达到什么要求，如何控制、形成什么记录和报告，以及相应的审批手续；规定在质量活动中需要注意的例外或情况的纠正措施，SOP应简练、明确和易懂并且工作人员熟练掌握和严格遵守。
  要完成一组PCR实验，通常需要经过试剂配制、样品处理、核酸扩增和产物分析4个实验过程；这4个实验过程的实验用房应相邻布置，组成一个立的PCR实验区。标准的PCR实验区包括:试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区、各区配套的缓冲区及公共走廊。

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  PCR检验试剂的准备—样品的制备—核酸或蛋白等目标物质的提取—PCR扩增实验—产物分析电泳、凝胶成像等或者荧光定量—结果判定—结果表达，出具检验报告。若采用“一步法”核酸提取技术，可在常温下快速裂解病原体，*加热煮沸和换管，通过简单的操作即可实现样本核酸的快速提取；若采用荧光定量PCR，则扩增和产物分析在同一个步骤中进行。
  实验室的整体设计和运作直接影响到检测结果的准确度、稳定性和生物等。PCR实验室整体解决方案包括规划设计管理、仪器试剂配套、技术服务支持、人员培训等多个方面，是一体化、多元化的系统解决方案。
  PCR实验室建设：
  1.主体结构：
  主体为彩钢板、铝合金型材；室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决*污染、积尘、不易清扫等问题；结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。
   2.标准的三区分隔和气压调节：
  将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增、分析三个（或）四个立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个立实验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。
  3.消毒：
  在三个实验区和三个缓冲区**部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。在试剂准备区和标本制备区 还设置移动紫外线灯，对实验桌进行局部消毒。
  4.机械连锁不锈钢传递窗：
  试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。
  5.地面
  地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面，整体性好，便于进行清扫，耐腐蚀。     
  6.照明
  灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。

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  由于PCR实验室在加样操作过程中可能产生气溶胶，为避免气溶胶扩散出去对外界造成污染，同时为了避免各房间之间通过风管系统交叉污染，实验室建议采用全新风系统；新风经热湿处理及初效、中效、或亚过滤后送入室内;各房间排风口单设置或亚过滤器。当房间无工艺设备排风时，可通过换气次数，工艺操作间换气次数为12~15次/h，缓冲间6~8次/h，计算得出房间送风量，然后根据缝隙法得出房间排风量;当房间有工艺设备如生物柜排风时，比较设备排风量与满足换气次数所需送风量，取两者之间的较大值，一般情况下，设备排风量较大，然后可根据缝隙法得出房间送风量。
  气流组织上，PCR实验室空调系统通常采用上送下排式的非单向流送风方式。房间上部送风口尽量均匀布置，且与生物柜操作面或其他有气溶胶操作地点的正上方保持一定距离;房间下部利用室内排风夹道上设置的排风口排风，排风口底部距地面0.1m，排风夹道需设置于室内被污染风险的区域，排风口前面不应有障碍物遮挡。
  PCR实验室内通常有生物柜、通风柜等生产设备，这类设备排风量大且使用时间有间隔性，并不与空调系统运行时间一致，这就导致有这些设备的房间在设备启停的时候很*失压，原本正常的压力梯度瞬间就破坏了。这正是PCR实验室空调系统设计的难点所在。温湿度控制：夏季调节表冷盘管动态压差平衡调节阀的开度以控制室内温湿度，湿度**;当为了调节室内湿度而造成温度过低时，开启加热盘管以控制室内温度；冬季调节加热盘管动态压差平衡电动调节阀的开度以控制室内温度，调节加湿器的开度以控制湿度。
  压力及变频控制：在空调系统各房间送风支管上设置压力无关型定风量阀，无工艺设备排风房间的排风支管上设置压力无关型定风量阀，从而恒定房间的风量以控制房间压力；在有工艺设备排风房间的排风支管上设变风量阀，根据房间内压差动作，以控制房间压力；需排风的工艺设备如生物柜排风支管上设变风量阀，根据设备开启度调节设备排风量。
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