动物细胞净化实验室GMP净化工程 设计装修公司

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实验室空气减湿方法及设备
1.减湿的方法
目前，常用的减湿方式有：冷却减湿、压缩减湿、吸收减湿、吸附减湿、组合减湿等。其中压缩减湿是把空气压缩以凝结多余水分，很少采用。
2.冷却减湿
冷却减湿，是目前洁净空调夏季应用较为广泛的一种减湿方式。冷却减湿有两种：表面冷却(表面式)、喷淋冷却(直接接触式)。相比而言，**种方式在组合式空调机组中应用更多一些。冷却减湿采用外接低温水等冷源，在对空气进行降温处理的同时降低了空气的相对湿度，减湿效果较好。直接在洁净室(区)内设置单的减湿设备，通常采用电气去湿器。这种减湿器结构小巧，设有立的压缩、冷凝、蒸发等制冷系统及风机系统，底盘上可加装小轮便于移动，十分方便，但减湿能力受到一定限制。
3.吸收减湿
吸收减湿的原理，是由于空气中水蒸气分压力大于吸湿剂表面饱和水蒸气的分压力，在压力差的作用下，空气中的水蒸气被吸湿剂吸收，并与之结合成水化物，直至吸湿剂饱和为止。常见的吸湿剂有氯化钙、氯化锂、三甘醇等。其中氯化锂由于吸湿量大，不会产生水溶液腐蚀设备以及再生简单，被广泛应用在转轮除湿机上。
吸湿剂可以再生。再生过程是吸湿的逆过程。再生时，通过高湿空气将转轮内纤维纸转芯加热，转芯内水蒸气分压力**空气的水蒸气分压力，氯化锂中的水分被空气带走，氯化锂重新变为结晶状而具备了吸湿能力。再生空气的加热有电加热、蒸汽加热两种形式。
氯化锂转轮除湿机的特点：除湿量大，转轮的蜂窝状孔道直径仅1.5mm，1m3体积转轮纸芯的吸湿面积可达3000m2，维护管理及运行调节简便，再生*，使用年限长，低温低湿状态下除湿效果好等，如与冷冻机联合使用，可获得-30℃以下低空气；此外，由于氯化锂具有强烈的杀菌作用，能将空气中90%以上的杀掉，因此在制药、食品、无菌室手术室等场合都得到广泛应用。
4.吸附减湿
吸附减湿的原理与吸收减湿基本类似，是由于水分在吸附剂表面毛细孔所形成的凹形弯月面上有很低的水蒸气分压力的缘故。
常用的吸附剂有硅胶。硅胶是一种*、无臭、无腐蚀性的固体，色泽半透明，多孔呈结晶块，孔的平均直径为4×10-7mm，仅为分子直径的7~10倍。在毛细孔的作用下，硅胶能吸附空气中的水分。吸湿率一般为其质量的30%。硅胶主要有白硅胶(原色)、蓝硅胶(变色)两种。 吸湿后的硅胶经150~180℃的热风加热再生后，能重复使用。以无机纤维为基材将硅胶以化学反应的方式形成并制成蜂窝状转轮，就成了活性硅胶转轮除湿机。

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细胞实验室*仪器：
一、CO2培养箱
CO2培养箱是细胞培养的*仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很*受到各种、微生物的感染，因此，CO2 培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。Thermo系列CO2培养箱具有的灭菌和抑菌功能。Hepa 过滤器，箱体内达到100级空气质量;不锈钢抛光内胆，有效抑制微生物附着;
二、纯水系统
细胞培养过程中，内对细胞的生长有很大的影响，水中的内直接参与细胞凋亡，血清中内含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代；内含量过高，会直接导致细胞提前老化。而常规的普通蒸馏水在玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水ddH20是不能满足要求的，细胞培养用水一般要求双蒸水(0. 8MQ以上)，因此，必须配置正式的水纯化系统，采用无内纯水配制所有培养用试剂。
三、**净工作台/生物*柜
细胞培养对无菌环境要求很高，与CO2培养箱一样，在细胞操作时，一般需要在100级空气质量条件下进行，因此**净工作台或生物*柜就必须配备。
四、液氮罐
为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，胚胎ESC，诱导多能IPS，间充质MSCs，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液 氮温度-196℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性，同时液氮罐必需配备报警器，液氮量减少时及时添补液氮量。
五、温冰箱
细胞的冻存过程需要一系列程序降温， 一般4°C 下存放30 min，转放-20°C 1hour，再转入-70至80°C过夜，之后才可以转移到液氮内(-196°C)，这时就必须配备一台-86C温冰箱。一般温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于温冰箱保存。
六、恒温水浴
从液氮或温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37°C水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室*仪器，复苏过程中要注意水浴时间1-2min，随时观察。
七、离心机
细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。
八、移液器和细胞培养的大量耗材
细胞实验中有大量频繁的移液操作，因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量大。
除上述仪器外，高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的*仪器。
常用的培养器皿：
培养瓶：由玻璃或塑料制成。主要用于培养、繁殖细胞。进行培养时培养瓶瓶口加盖螺旋瓶盖或胶塞，胶塞多用于密封培养。国产培养瓶的规格以容量(ml)表示，如250ml、100ml、 25ml 等；进口培养瓶则多以底面积(cm2) 表示。
培养皿:由玻璃或塑料制成，供盛取、分离、处理组织或做细胞毒性、集落形成、单细胞分离、同位素掺入、细胞繁殖等实验使用。常用的培养皿规格有10cm、9cm、6cm、 3. 5cm等。
多孔培养板：为塑料制品。可供细胞克隆及细胞毒性等各种检测实验使用。其优点是节约样本及试剂，可同时测试大量样本，易于进行无菌操作。培养板分为各种规格，常用的规格有: 96孔、24孔、12孔、6孔、4孔等。

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 实验室设计应遵循一般平面设计原则：分区明确、流线清晰、可持续性。功能区的划分有：更衣室、样本接收室、制备室、洗消室、洁净缓冲间、物料存储室、储存室、废弃物暂存间、培养室、离心间等。每一类分析的操作间应有单的、适宜的空间操作区域，送检样品的接收和储存区域，废弃物存放区域，物品的存放区域；满足空间、设施、设备、洁净度的要求和质量控制区应与制备区实施物理隔离。
  细胞实验室应有严格的流程控制，符合各操作的实验流程。在设计流程中注意控制人物流走向、样本走向、成品走向和污物走向等，避免交叉污染等情况。实验室设计时必须的几个重点区域：核心区：制备间及细胞培养；区：准备，清洁，消毒等其他功能区域；存储区域做样品的存储；更鞋缓冲人、物流区域。
  实验室内严禁烟火，也不能在实验室内点火取暖，严禁闲杂人员入内；充分熟悉*用具，如灭火器、急救箱的存放位置和使用方法，并妥加爱护；能产生有毒气体的实验不能进入细胞实验室；实验完毕后，对实验室作一次系统的检查，随时关好门窗，防火、防盗、防破坏；实验开始前，检查仪器是否完整无损，装置是否正确稳妥；实验进行时，应该经常注意仪器有无漏气、碎裂，反应进行是否正常等情况；要注意*用电，不要用湿手、湿物接触电源，实验结束后应及时切断电源。

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  无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰。理想的无菌操作室应划为三部分：更衣室、缓冲间、无菌操作间。更衣室供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩；缓冲间位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境。无菌操作间于无菌操作、细胞培养；其大小要适当，且其**部不宜过高，不**过2.5m，以保证紫外线的效果；墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。  
  清洁和消毒区应与其他区域分开，主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作。储藏区：主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等，此环境也需要清洁无尘。孵育区：本区对无菌的要求虽不比无菌区严格，但仍需清洁无尘，因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行，后者费用高，一般实验室多采用孵箱进行工作。制备区：在该区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。 
  目前绝大部分细胞实验室使用**净工作台实现无菌操作，具有操作简单、安装方便、占用空间小且净化效果很好。侧流式工作台：空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧，也有从上向下或从下向**向对侧，形成气流屏障保持工作区无菌，工作台结构为封闭式；外流式工作台：净化后的空气面向操作者流动，因而外方气流不致混入操作，工作台结构为开放式，但进行有害物质实验操作对操作者不利。**净工作台应需要定期请有关部门检查洁净度，符合要求的**净工作台其洁净度应达到100级，用尘埃粒子计数仪检测粒径≤5μm的尘埃粒子数量不应**过3.5个/L；空气流量应控制在0.75-1.0m3/s；菌落数平均<1个，根据无菌状况必要时需要置换过滤器。
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