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中净环球净化科技有限公司可提供PCR实验室、基因扩增实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
基因扩增实验又称 PCR实验,是用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法,测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒;由于该检测方法可以测出普通检验难以检测出的病毒并具有灵敏度高、特高、快捷、对样品要求低等优点,因此被广为认可,已广泛应用于的诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断;但是这种实验需要有能***、配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。近年来对基因扩增检验实验室的建设越来越得到重视,因为它对检测结果的可靠性、准确性和*性起到至关重要的作用。
基因扩增检验实验室设计的核心问题是如何避免污染,因此实验室的平面布局、空调通风系统设计、气流控制等都是围绕这个核心问题进行的。PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式,同时要严格控制送、排风的比例以**各实验区的压力要求。
标本污染主要有收集标本的容器被污染;标本存放运输时,由于密封不严或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;核酸模板在提取过程中,由于加样污染导致标本间污染;手动提取核酸样本时,污染的手套触摸离心管内盖导致的污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。一个正规的实验室,要时刻注意监测实验室的污染情况。了解实验室有无污染,污染原因,污染程度,以便采取有效措施,防止和*污染,一般通过阴阳性对照检测污染情况。PCR阳性对照对于被建立PCR反应实验室及一般的检验单位都是必需设有的, PCR反应是否成功,PCR阳性对照是一个重要的参考标志;如果阴性对照和阳性对照均成立,说明质量控制成立,实验室未被污染,样本检测结果才有效;如果阴性对照不成立,出现扩增曲线,说明阴性对照被核酸污染,需要追溯污染源。
中净环球净化科技有限公司可提供PCR实验室、核酸检测实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
PCR实验室区域设置
一、选址:
PCR实验室应相对立,尽量避免与其他普通实验套叠或者有通道上的交叉。我们看过一个图,他们的PCR实验室设置在检验科的里面,医废和标本的运送要穿过检验科的整个走廊,这种情况、物流、污物均在同一个通道,交叉感染风险较高,应尽量避免。
二、设置区域:
PCR实验室应设置以下区域:试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这个4个区域在物理空间上必须完全立,各区域无论是空间上还是在使用中,应当始终处于完全的分割状态,不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能,区域可以适当合并。每个区域间设置传递窗,要求一侧打开时另一侧无法打开。
4个区域应设置立的缓冲间,应设置可以通到四个操作区域的PCR走廊,在进入各区域前,应设置更衣间,每个区域的衣服可用不同颜色进行区分,在清洁区应设置洗澡间、卫生间、值班室。还应考虑到医废和标本的运送通道。
三、空气流向:
PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为了避免各个实验区域间交叉感染的可能性,通风方式应为机械通风,不应自然通风,且不宜使用循环风。同时要严格控制送、排风比例以**各试验区的压力要求。
PCR实验室的空气流向应按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区进行,防止扩增的产物顺空气气流进入扩增前的区域。可选择负压排风装置,核心区域相对于相邻区域小压不小于-10Pa。也可通过安装排气扇或者其他方式实现。PCR实验室要求温度18~26℃,相对湿度30%~70%。
中净环球净化科技有限公司可提供PCR实验室、检测实验室、检验实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
进入各工作区域应当严格按照单一方向进行,即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区;各工作区域必须有明确的标记,不同工作区域内的设备、物品不得混用;不同的工作区域使用不同的工作服例如不同的颜色;工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出;实验室的清洁应当按试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区的方向进行,不同的实验区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污染;工作结束后,必须立即对工作区进行清洁,实验台表面的紫外照射应当方便有效可移动紫外灯,254nm波长,在工作完成后调至实验台上60~90cm内照射。
试剂盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在试剂储存和准备区 ,应当保存在标本处理区;由于在样本混合、核酸纯化过程中可能会发生气溶胶所致的污染,可通过在标本制备区内设立正压条件,避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,为避免样本间的交叉污染,加入待测核酸后,必须盖好含反应混合液的反应管;必须注意的是所有经过检测的反应管不得在扩增区打开;须注意避免通过扩增产物分析区的物品及工作服将扩增产物带出。
完备的实验室配套设施是**实验工作的必要条件,应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如**净工作台、离心机、加样器等。
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实验室的送风量与排风量保持一定的风量差必然会导致室内外一定的压差,当室内总送风量大于室内回风、排风总量时,空气通过余压阀和房间缝隙排出,与相邻区域建立起正压,避免环境中的污染物进入室内,如要求洁净度较高的场所;当房间总送风量小于回风、排风总量时,空气通过相邻房间或室外进入室内,室内呈负压,此类负压视为了**环境的*,**未经处理的污染物不会流向室外。
对于压力控制精度高且需要压力稳定的场所,多用余风量控制法,同时加入压力传感器和控制器对余风量进行设定,以产生压差的余风量确定送、排风量,同时对余风量进行检测,当余风量偏离设定值达到一定程度时,系统自动报警,此时需要对测量装置或可能产生漏风量的设备进行吹,余风量控制与压力控制相结合,可以实现系统的动态控制,确保压力系统压差的准确。
送风系统主要有送风机、管道、风阀、中效过滤或过滤送风口,送风系统新风口应采取有效的防雨措施,安装保护网,且应**室外地面2.5m以上,同时应尽可能远离污染源。基因扩增实验室实验过程中或存在有害有味的气体,所以核心功能间全部采用室外空气的系统,但其能量损耗。全新风范围:试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区均为全新风,功能间、洗衣间、洁具间、器具清洗间、污物暂存间可立空调系统,采用多联机空调或常规循环风系统。样本库放在冷库可单设备用双空调系统,无冷库的样本库内放置多个冰箱,具有较大热量,可由立单制冷空调实现,**冬天温度较低。在生物*柜操作面或其他有气溶胶操作地点的上方附近不得设送风口。
