植物细胞培养GMP无菌生产车间洁净工程

中净环球净化可提供实验室、细胞实验室、GMP实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。 
实验室管理使用规程
1目的建立实验室管理使用规程，保证操作者正确使用。
2范围适用于实验室操作。
3责任者操作人员、实验室管理人员。
4内容
4.1实验室应严禁放置杂物,无关人员严禁入内。
4.2实验室应严格保持整洁，防止污染，定期消毒。实验室应每次使用前后用0.1%新洁尔灭溶液擦拭工作台面及可能污染的死角，湿拖地面，每周湿擦墙面及天花板。定期清洁空气净化器，做好消毒记录。无菌衣每周送供应室消毒。
4.3实验人员用肥皂洗手后进入缓冲间换拖鞋，用75%棉球擦手，穿戴工作衣帽、口罩。进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。帽子要将全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。
4.4将所需物品剥去牛皮纸及外包装，从传递窗移入操作间。所有进出实验室的物品需通过传递窗通道，并且需经过紫外线消毒或75%酒精消毒。
4.5**净工作台使用前开启紫外灯照射30分钟，使用时打开吹风净化工作台，操作完毕及时清理消毒。
4.6取无菌物品时，必须用无菌钳(镊）,镊子剪刀等在每次使用前后，必须通过火焰灭菌冷却后方可使用。未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区。器如需回抽时，应对着火焰吸入无菌空气。
4.7实验过程严格按照无菌操作规程操作，进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，应更换或重新灭菌。所有消毒火菌物品必须及时标明打开时间，并在规定时限内使用。实验完毕，整理检品及各种用具并清洁工作台面。
4.8细胞培养箱、离心机等实验仪器根据各自要求定期消毒。新配培养液等试剂送检无菌后使用。
4.9各种消毒灭菌剂根据其性能及产品说明与要求配置，并按要求定时测试浓度,保证消毒灭菌效果。实验室定期进行洁净度测试检查沉降菌（在室内打开血琼脂平板30分钟，经37C培养48h),100级平均菌落数不得过1个/皿，如**过应进行清洁消毒。

中净环球净化可提供细胞实验室、实验室、GMP实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。 
细胞培养实验室设备配置及用途 
1. 烘箱（干燥箱） 
用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热。干热时，烘箱内温度一般要达到160℃以上，通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至100℃时，停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。后不能立即打开箱门，以免骤冷导致玻璃器皿破裂，应等温度自然下降至100℃以下后可开门。 
2. 水纯化装置 
细胞培养对水的质量要求较高，细胞培养、细胞培养相关液体的配制用水以及清洗细胞培养器皿用水都必须事先经过严格的纯化处理。目前有多种纯化方法相结合，可使普通水纯化为纯水和**纯水的纯水装置使用非常灵活方便，可挂壁式、台式、可配储水箱、也可直接用分液、还可根据各类实验用水要求选择配置功能，有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，更有可有效去除掉热源、内的超滤型纯水装置。
3. 冰箱 
细胞培养实验室*设备，应，不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质，且应保持清洁。一般包括普通冰箱、低温冰箱和温冰箱。 
普通冰箱：储存培养液、生理盐水、Hanks液试剂等培养用的物品，可短期保存组织样本。 
 -20℃低温冰箱、温冰箱：用于储存需要冷冻以保持生物活性以及需长时期存放的制剂，如酶、血清等。 
4. 细胞冷冻储存器 
 储存器常用的液氮容器，根据使用需要分为不同类型和规格。选择液氮容器时需要考虑三个因素：容积大小、取放使用方便、液氮挥发量。液氮容器的大小一般在25-500L，可以储存1ml的冻存管250-15000个左右。液氮温度文帝可达-196℃，使用时应注意避免。由于液氮易挥发，需注意观察剩余液氮量，及时补充，避免液氮不足使细胞受损或。目前有许多智能型细胞冷冻储存器可供选择，可配置有电子控制器的液氮储存器，实现冻存自动化；并可监测液氮水平和样品温度，确保样品温度始终处于设定温度点；可配置报警系统，设置液氮液面、温度、电池、电压、电源等失常情况下报警；同时具备热气体旁路系统，防止高于-130℃的暖空气进入液氮罐，从而更有效地保护样品，防止容器内升温。另外，可选择液氮供应罐通过连接管给储存罐补充液氮，保证样品。 
5. 离心机 
细胞培养时，通常使用离心机制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤和收集细胞。一般常规配置4000rpm台式离心机；若要做细胞沉降，需要使用80-100G离心力，因为离心力过大会损伤细胞。根据不同要求，有大容量、可调温度离心机、高速离心机和低温冷冻离心机等更多功能离心机可选择。
6. 天平 
常用的有精密天平和分析天平。分析天平的度一般为0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根据取样量量和精度要求选择合适的天平：取样量大于100mg宜选用度0.1mg的天平；取样量100-10mg，选用度0.01mg的天平；取样量10mg宜选用度0.001mg的天平。天平需要定期校准，可选择有自动校准功能的天平，方便维护。天平使用需要注意清洁，避免腐蚀性粉末、液体直接接触称量台。

中净环球净化可提供实验室、第三方检测实验室、微生物实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
  常用细胞培养器皿有培养瓶,培养板,培养皿等，常准备量是使用量的三倍，器皿应选择透明度好,*,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液,血清等液体,常用规格有500ml,250ml, 100ml等几种；培养皿:用于开放式培养及其它用途，分直径30mm,60mm,120mm等几种；吸管:常用的有长吸管和短吸管两类,长吸管也称刻度吸管，其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度吸管用于移动液体，常用1ml和10ml两种。
  培养瓶:根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异,用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀,便于细胞贴壁生长和观察,瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml,100ml,50ml,25ml,10ml等几种。离心管:离心管是细胞培养中使用广泛的器皿,根据用途不同形态各样,常用于细胞培养的离心管有大腹式尖底离心管和普通尖底离心管两类。前者分别为50ml,30ml,15ml;后者则多为10ml和5ml。其它:如三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,器等。
  维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度，不同种类的细胞对培养温度要求也不同，人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响；培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不**过39℃时,细胞代谢与温度成正比。

中净环球净化可提供实验室、细胞实验室、检测实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
  实验室采用的层流净化系统, 能保证实验室恒温、恒湿、新风量和洁净度要求。该系统通过粗、中、3 种不同孔径的过滤膜， 对空气中不同粒径的尘埃粒子进行过滤, 让尘埃粒子不进入实验室, 从而使附着在尘埃粒子上的微生物，霉菌等不能污染实验室；采用从**部送风、下侧回风的气流组织方式，既能保证洁净度， 又能节约能源；高低洁净度级别的房间维持一定正压差，防止洁净度低的空间污染洁净度高的空间；安装紫外光灯；工作时风淋室吹去附着在工作服及样品外包装上的部分尘埃，传递窗传递干净的实验用品，这些设计能达到无菌室的洁净要求。
  实验室天花采用防尘，光滑，耐燃，钢板夹心的洁净板，两边用槽型铝封边,彩钢板与彩钢板之间用中性瓷白玻璃胶密封；实验室净化区地面铺贴PVC地板；地面与墙面，墙面与墙面,墙面与天花板交接均采用半径50mm的铝合金圆弧处理，彩钢板与彩钢板之间用中性瓷白玻璃胶密封,防止有缝滋生霉菌；实验室墙体为采用防尘，光滑，耐燃，钢板夹心的彩钢板墙体固定采用50X30槽型铝做地槽；洁净板隔断之间阳角处装铝合金外圆弧,隔断与隔断之间，隔断与天花之间，隔断与地面之间的阴角封R50铝合金内圆弧，圆角线三维汇交处安装铝合金**球片，门口断开处应收口，阳角柱与天花的交角。
  规划设计时洁净区、非洁净区完全分开；办公区域与实验区域的通风系统应立分开；不同科室应设有防污染措施，如缓冲间、气闸室和传递窗等；人、物流通道应立设置，避免混杂和交叉污染；物料、废弃物应设传递窗，并具备消毒功能；办公区域与实验区域应进行物理隔离，工作人员由通道进入实验区。
http://ccg009.cn.b2b168.com