植物细胞培养洁净车间厂房洁净工程

中净环球净化可提供实验室、细胞实验室、GMP实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。 
实验室管理使用规程
1目的建立实验室管理使用规程，保证操作者正确使用。
2范围适用于实验室操作。
3责任者操作人员、实验室管理人员。
4内容
4.1实验室应严禁放置杂物,无关人员严禁入内。
4.2实验室应严格保持整洁，防止污染，定期消毒。实验室应每次使用前后用0.1%新洁尔灭溶液擦拭工作台面及可能污染的死角，湿拖地面，每周湿擦墙面及天花板。定期清洁空气净化器，做好消毒记录。无菌衣每周送供应室消毒。
4.3实验人员用肥皂洗手后进入缓冲间换拖鞋，用75%棉球擦手，穿戴工作衣帽、口罩。进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。帽子要将全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。
4.4将所需物品剥去牛皮纸及外包装，从传递窗移入操作间。所有进出实验室的物品需通过传递窗通道，并且需经过紫外线消毒或75%酒精消毒。
4.5**净工作台使用前开启紫外灯照射30分钟，使用时打开吹风净化工作台，操作完毕及时清理消毒。
4.6取无菌物品时，必须用无菌钳(镊）,镊子剪刀等在每次使用前后，必须通过火焰灭菌冷却后方可使用。未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区。器如需回抽时，应对着火焰吸入无菌空气。
4.7实验过程严格按照无菌操作规程操作，进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，应更换或重新灭菌。所有消毒火菌物品必须及时标明打开时间，并在规定时限内使用。实验完毕，整理检品及各种用具并清洁工作台面。
4.8细胞培养箱、离心机等实验仪器根据各自要求定期消毒。新配培养液等试剂送检无菌后使用。
4.9各种消毒灭菌剂根据其性能及产品说明与要求配置，并按要求定时测试浓度,保证消毒灭菌效果。实验室定期进行洁净度测试检查沉降菌（在室内打开血琼脂平板30分钟，经37C培养48h),100级平均菌落数不得过1个/皿，如**过应进行清洁消毒。

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  洁净实验室净化空调有多种形式: 全新风净化空调系统设过滤，采用**送风下排风，排风出口设净化处理装置。循环风空调箱通过送风管，再经过ULPA过滤器或HEPA过滤器将空气送入洁净室，气流向下送入洁净间，再经竖直回风夹道进入吊顶回风；空气多次进入循环风空调箱过滤，使用不同类型的中过滤器，提供了节约成本和使用能源的选择。
  实验室的恒温恒湿，无菌，冻干，**净台温湿度按要求，换气次数为10~25 h。对温、湿度无工艺要求时室温为20～26℃，相对湿度小于70%。洁净实验室空调采用带有两级过滤的净化空调机组，初效过滤器用易清洗更换的合成纤维过滤器，中效过滤器集中设置在空调机组的正压段，处理后的送风在进入房间时由空气过滤器或亚空气过滤单元过滤。洁净室应维持一定的正压，送风与排风管上安装变风量装置，控制房间的压力梯度，洁净区与缓冲区之间的静压差不小于5Pa，洁净区与室外的静压差不小于10 Pa。
  对有恒温、恒湿要求的实验室，采用带立冷源的风冷恒温恒湿空调机组；机组设电加热器，或设移动式除湿机，满足房间温湿度及干燥度的要求；对恒温恒湿要求不高的场所采用变制冷剂流量机组，空调系统及设备的选择具有经济实用、使用灵活、技术等特性。万级恒温恒湿洁净实验室的空调机组可布置在机房或吊顶上，通常需要的冷热量不是很大，系统的循环风量较大，可将回风分两路，一部分经盘管，另一部分与处理的空气混合，经过滤器送出。

中净环球净化可提供实验室、细胞实验室、第三方检测实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
  洁净实验室净化空调有多种形式：全新风净化空调系统设过滤，采用**送风下排风，排风出口设净化处理装置。循环风空调箱通过送风管，再经过ULPA过滤器或HEPA过滤器将空气送入洁净室，气流向下送入洁净间，再经竖直回风夹道进入吊顶回风。空气多次进入循环风空调箱过滤，使用不同类型的中过滤器，提供了节约成本和使用能源的选择。应了解实验室通风柜的功能，按排放气体和实验室进行通风系统设计。对实验室房间内通风的*性要足够重视。通风柜的集尘捕捉能力要符合现行标准和规定，保证一定数量的换气次数，让送风气流流向实验室，保持实验室负压；另外，为实验人员创造舒适的工作环境，降低噪声，系统要*控制，易于管理，能稳定、低能耗运行。
  有洁净要求的空调机组，初效空气过滤器不能用浸油式，中效过滤器集中设置在空气调机组的正压段，在净化房问设过滤进风口；选择时中效及空气过滤器按额定风量选择，阻力、效率相近的空气过滤器设置在同一洁净室内，空气过滤器的安装应简便可靠，宜于检漏和更换；洁净空调机组的送风机要按净化空调系统的总送风量和总阻力值进行选择。中效、空气过滤器的阻力按其初阻力的2倍考虑取值。设计净化空调系统时还要注意：回、排风口风速≤1m/s，回、排风支管风速≤3m/s，回风总管风速≤3～4m/s；表冷器的迎面风速空凋机组≤2.2m/s，新风机组≤2.5m/s；对送风装置，过滤器送风口实际风量应小于样本给出的风量值；选用定风量控制器时，应注意同一位置上只能使用同一规格的定风量控制器。
  通风柜的选择除满足排风和捕捉能力外，还要能根据调节门开度改变排风量，维持表面风速恒定在0.5m/s；在安装调试时应按柜门位移为信号来确定排风量，接受调节门感应器信号后可以计算调节门开启面积风量，送风量跟随排风量即刻变化；实验室内压力梯度控制和小通风量的控制也是很关键的，否则也会导致通风柜排风不稳定。选择通风柜时，要考虑实验室的空间、通风柜的摆放，根据实验内容选择其外形尺寸，体积太大造成浪费，过小则影响使用；通风柜还要远离空气扰动大的地方，远离送风口，避免造成能源浪费；排风管道的没计原则是管内为负压，防止管道废气泄漏，排风管长度越短越好，而且一台风机连接的通风柜越少越好；排风通道尽可能竖直布置，通道越高越好，如需改变风道风速，则应配置相应的变频调节系统，注意排风通道的末端应避开补风管道送气口。

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细胞培养实验室设备配置及用途 
1. 烘箱（干燥箱） 
用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热。干热时，烘箱内温度一般要达到160℃以上，通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至100℃时，停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。后不能立即打开箱门，以免骤冷导致玻璃器皿破裂，应等温度自然下降至100℃以下后可开门。 
2. 水纯化装置 
细胞培养对水的质量要求较高，细胞培养、细胞培养相关液体的配制用水以及清洗细胞培养器皿用水都必须事先经过严格的纯化处理。目前有多种纯化方法相结合，可使普通水纯化为纯水和**纯水的纯水装置使用非常灵活方便，可挂壁式、台式、可配储水箱、也可直接用分液、还可根据各类实验用水要求选择配置功能，有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，更有可有效去除掉热源、内的超滤型纯水装置。
3. 冰箱 
细胞培养实验室*设备，应，不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质，且应保持清洁。一般包括普通冰箱、低温冰箱和温冰箱。 
普通冰箱：储存培养液、生理盐水、Hanks液试剂等培养用的物品，可短期保存组织样本。 
 -20℃低温冰箱、温冰箱：用于储存需要冷冻以保持生物活性以及需长时期存放的制剂，如酶、血清等。 
4. 细胞冷冻储存器 
 储存器常用的液氮容器，根据使用需要分为不同类型和规格。选择液氮容器时需要考虑三个因素：容积大小、取放使用方便、液氮挥发量。液氮容器的大小一般在25-500L，可以储存1ml的冻存管250-15000个左右。液氮温度文帝可达-196℃，使用时应注意避免。由于液氮易挥发，需注意观察剩余液氮量，及时补充，避免液氮不足使细胞受损或。目前有许多智能型细胞冷冻储存器可供选择，可配置有电子控制器的液氮储存器，实现冻存自动化；并可监测液氮水平和样品温度，确保样品温度始终处于设定温度点；可配置报警系统，设置液氮液面、温度、电池、电压、电源等失常情况下报警；同时具备热气体旁路系统，防止高于-130℃的暖空气进入液氮罐，从而更有效地保护样品，防止容器内升温。另外，可选择液氮供应罐通过连接管给储存罐补充液氮，保证样品。 
5. 离心机 
细胞培养时，通常使用离心机制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤和收集细胞。一般常规配置4000rpm台式离心机；若要做细胞沉降，需要使用80-100G离心力，因为离心力过大会损伤细胞。根据不同要求，有大容量、可调温度离心机、高速离心机和低温冷冻离心机等更多功能离心机可选择。
6. 天平 
常用的有精密天平和分析天平。分析天平的度一般为0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根据取样量量和精度要求选择合适的天平：取样量大于100mg宜选用度0.1mg的天平；取样量100-10mg，选用度0.01mg的天平；取样量10mg宜选用度0.001mg的天平。天平需要定期校准，可选择有自动校准功能的天平，方便维护。天平使用需要注意清洁，避免腐蚀性粉末、液体直接接触称量台。
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