细胞*无尘室厂房净化工程 安装

中净环球净化可提供细胞实验室、实验室、GMP实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。 
细胞培养实验室设备配置及用途 
1. **净工作台 
目前绝大部分细胞实验室使用**净工作台实现无菌操作，具有操作简单、安装方便、占用空间小且净化效果很好。现在介绍两种主要**净工作台-侧流式（垂直式）和外流式（水平层流式）。工作原理一般是将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。 
（1）侧流式工作台：空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧，也有从上向下或从下向向对侧，形成气流屏障保持工作区无菌，工作台结构为封闭式； 
（2）外流式工作台：净化后的空气面向操作者流动，因而外方气流不致混入操作，工作台结构为开放式，但进行有害物质实验操作对操作者不利。**净工作台应需要定期请有关部门检查洁净度，符合要求的**净工作台其洁净度应达到100级，用尘埃粒子计数仪检测粒径≤5μm的尘埃粒子数量不应**过3.5个/L；空气流量应控制在0.75-1.0m3/s；菌落数平均<1个，根据无菌状况必要时需要置换过滤器。 
2. 显微镜 
倒置式显微镜是细胞培养实验室日常工作常规*设备，主要用于日常了解细胞的生长情况并观察有无污染发生。如资金允许，建议选用配置有照相系统的相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、录像系统或缩时电影拍摄装置等，可随时拍摄并记录细胞生长情况。 
3. 培养箱 
体外培养的细胞和体内细胞一样，需要在恒定的温度下生存，一般适生长温度为37℃，温差变化不应**过±0.5℃。温度升高2℃时，变不利于细胞生存，温度达到40℃以上细胞将很快。因此，可控温的恒温培养箱、CO2培养箱是选择。 
（1）恒温培养箱：应选隔水式或晶体管式自控温培养箱，此类培养箱灵敏度高，温度控制较稳定。一般的恒温培养箱价格较*，其缺点是只宜于作密闭式培养。 
（2）CO2培养箱：目前多数的细胞培养室已广泛使用。CO2培养箱的优点是能够提供进行细胞培养时所需要的一定量的CO2（常用浓度为5％），易于稳定培养液pH，适用于开放或半开放培养。使用培养瓶时，为使培养瓶内与外界保持通气状态，可将瓶盖略微旋松，为避免细胞被污染，使用这种培养方式时，培养箱内空气必须保持清洁，需定期用紫外线照射或酒精，同时培养箱内应放置盛有无菌蒸馏水的水槽，防止培养液蒸发，保持箱内相对湿度在。 
（3）细胞培养耗材：培养细胞的器皿可用培养皿、培养板或培养瓶。

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  洁净实验室净化空调有多种形式：全新风净化空调系统设过滤，采用**送风下排风，排风出口设净化处理装置。循环风空调箱通过送风管，再经过ULPA过滤器或HEPA过滤器将空气送入洁净室，气流向下送入洁净间，再经竖直回风夹道进入吊顶回风。空气多次进入循环风空调箱过滤，使用不同类型的中过滤器，提供了节约成本和使用能源的选择。应了解实验室通风柜的功能，按排放气体和实验室进行通风系统设计。对实验室房间内通风的*性要足够重视。通风柜的集尘捕捉能力要符合现行标准和规定，**一定数量的换气次数，让送风气流流向实验室，保持实验室负压；另外，为实验人员创造舒适的工作环境，降低噪声，系统要*控制，易于管理，能稳定、低能耗运行。
  有洁净要求的空调机组，初效空气过滤器不能用浸油式，中效过滤器集中设置在空气调机组的正压段，在净化房问设过滤进风口；选择时中效及空气过滤器按额定风量选择，阻力、效率相近的空气过滤器设置在同一洁净室内，空气过滤器的安装应简便可靠，宜于检漏和更换；洁净空调机组的送风机要按净化空调系统的总送风量和总阻力值进行选择。中效、空气过滤器的阻力按其初阻力的2倍考虑取值。设计净化空调系统时还要注意：回、排风口风速≤1m/s，回、排风支管风速≤3m/s，回风总管风速≤3～4m/s；表冷器的迎面风速空凋机组≤2.2m/s，新风机组≤2.5m/s；对送风装置，过滤器送风口实际风量应小于样本给出的风量值；选用定风量控制器时，应注意同一位置上只能使用同一规格的定风量控制器。
  通风柜的选择除满足排风和捕捉能力外，还要能根据调节门开度改变排风量，维持表面风速恒定在0.5m/s；在安装调试时应按柜门位移为信号来确定排风量，接受调节门感应器信号后可以计算调节门开启面积风量，送风量跟随排风量即刻变化；实验室内压力梯度控制和小通风量的控制也是很关键的，否则也会导致通风柜排风不稳定。选择通风柜时，要考虑实验室的空间、通风柜的摆放，根据实验内容选择其外形尺寸，体积太大造成浪费，过小则影响使用；通风柜还要远离空气扰动大的地方，远离送风口，避免造成能源浪费；排风管道的没计原则是管内为负压，防止管道废气泄漏，排风管长度越短越好，而且一台风机连接的通风柜越少越好；排风通道尽可能竖直布置，通道越高越好，如需改变风道风速，则应配置相应的变频调节系统，注意排风通道的末端应避开补风管道送气口。

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  实验室设计：各功能区域相对立；满足空间、设施、设备、洁净度要求；严格控制微生物、各种微粒和热原的污染风险；质量控制区应与制备区实施物理隔离，此处可以理解成用建筑物(彩钢板)隔离。细胞制备、质量控制直接相关的仪器，应经过验证或确认，经质量管理部门批准后方可使用，并进行计划性校验和维护，如灭菌柜、**净工作台、生物*柜、空气净化系统和工艺用水系统。
  万级无菌实验室利用送、回风量维持房间压差；送风经初、中、过滤后送入室内。从保温角度考虑实验室的围护及吊顶结构采用厚度为50mm的净化实验室复合净化板，优点：机械强度高，隔热、防潮性能好、平整光滑、耐腐蚀、易清洁、安装方便；顶棚及板壁的墙角处和墙与地面、墙与吊顶采用圆弧阴阳过渡并封闭；所有配套铝合金型材均采用电泳型材，以防止实验室以后消毒时导致铝材氧化。
  从节能角度考虑实验室系统设计为新风+回风混合系统，采用**送侧下回的气流组织方式。实验室消毒采用紫外线灯照射消毒。实验室照明均采用洁净室照明灯具，不锈钢斜边型吸顶式带罩密封灯具；特点：镜面全内胆，照明度强，不锈钢边框年久不腐蚀，外形美观，密封好、抗干扰、不积尘、易清洁。实验室新风管上均安装电动密闭阀以防止关机时空气回流，并能封闭消毒。万级无菌实验室采用风冷直接膨胀式净化风管型空调机组，满足实验室夏季、冬季冷热负荷，保持实验室恒温恒湿。

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细胞培养实验室规划要求：
细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须**无微生物污染和不受其它有害因素的影响，其实验室设计的原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁，空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。
常用设施及设备
(1)**净工作台：也称净化工作台，分为侧流式，直流式和外流式类。
(2)无菌操作间：一般由更衣间，缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱，离心机，倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱，冷藏器及消毒好的无菌物品等。
(3)操作间：普通培养箱，离心机，水浴锅，定时钟，普通天平及日常分析处理物。
(4)洗刷消毒间：烤箱，消毒锅，蒸馏水处理器及酸缸等。
(5)分析间：显微镜，计算机及打印机等。
细胞培养实验室规划要求
培养器皿
常用细胞培养器皿有培养瓶，培养板，培养皿等。常准备量是使用量的三倍，器皿应选择透明度好，*，利于细胞粘附和生长的材料，常用一次性聚苯乙-烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面几种：
(1)液体储存：用于储存各种配制好的培养液，血清等液体，常用规格有500ml，250ml， 100ml等几种.
(2)培养瓶：根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异，用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀，便于细胞贴壁生长和观察，瓶口要大小一致，口径一般不小于1cm，允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml，100ml，50ml，25ml，10ml等几种。
(3)培养皿：用于开放式培养及其它用途，分直径30mm，60mm，120mm等几种。
(4)吸管：常用的有长吸管和短吸管两类，长吸管也称刻度吸管。其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度吸管用于移动液体。常用1ml和10ml两种，短吸管也叫滴管，分弯头和直头两种。
(5)离心管：离心管是细胞培养中使用广泛的器皿，根据用途不同形态各样，常用于细胞培养的离心管有大腹式尖底离心管和普通尖底离心管两类.前者分别为50ml，30ml，15ml；后者则多为10ml和5ml。
(6)其它：如三角烧瓶，烧杯，量筒，漏斗，器等。
细胞培养温度
维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求也不同。
人体细胞培养的标准温度为36.5±0.5，偏离这一温度范围，细胞的正常代谢会受到影响，甚至。
培养细胞对低温的耐受力较对高温强，温度上升不**过39时，细胞代谢与温度成正比；人体细胞在39-401小时，即能受到一定损伤，但仍有可能恢复；在40-411小时，细胞会普遍受到损伤，仅小半数有可能恢复；41-421小时，细胞受到严重损伤，大部分细胞，个别细胞仍有恢复可能；当温度在43以上1小时，细胞全部。
相反，温度不低于0时，对细胞代谢虽有影响，,但并无伤害作用；把细胞放入25-35时，细胞仍能生存和生长，但速度减慢；放在4数小时后，再回到37培养，细胞仍能继续生长。
细胞代谢随温度降低而减慢。当温度降至冰点以下时，细胞可因胞质结冰受损而。但是，如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油)，可在深低温下如-80或-196(液氮)长期保存。
合适的气体环境
气体是哺乳动物细胞培存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。
氧气参与三羧酸循环，产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。
开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中。二氧化碳既是细胞代谢产物，也是细胞生长繁殖所需成分，它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值。
大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响。但细胞耐酸性比耐碱性大一些，在偏酸环境中更利于细胞生长。但有一些细胞也喜欢偏碱环境中生长，如成纤维细胞适合pH是7.4-7.6。每种细胞都有其适pH值。