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PCR实验室设计要点
PCR实验室可以是分散形式,也可以是组合形式。完成一组PCR实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎过程。
一、分散形式PCR实验室
所谓分散形式PCR实验室,是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。对于这种布置形式的PCR实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此*条件要求。
二、组合形式PCR实验室
所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置,组成立实验区域的形式。对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,*造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在处设缓冲间,以减少室内外空气交换。
一些经验:
试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染;
可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。
核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。
在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。PCR实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到**,且高度为地面铺装好后2600mm处。
如果使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。
若房间进深允许,可设PCR内部走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比走廊更有意义。
各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
中净环球净化可提供基因扩增实验室、PCR实验室、检测实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
基因扩增实验室和研究工作室的室内净高:当不设置空气调节时,建议不宜低于2.7m,一般为2.7m—2.9m;设置空气调节时,不应低于2.4m,一般为2.4m—2.6m。走道净高不应低于2.2m。基因扩增实验室各个房间的面积并没有严格要求,但是生物*柜房间建议不能低于10平米,一般为15平米以上,并且每增加一台生物*柜,房间建议增加10平米;样本间的面积相比其他房间要稍大一些。
基因扩增实验室外窗应具有良好的密闭性及隔热性,窗户的面积根据房间的尺寸来确定,底层、半地下室及地下室的外窗应采取防虫及防啮齿动物的措施。由一个标准单元组成的实验室的门洞宽度应为0.8—0.9m,高度不应小于2.10m;由一个及以上标准单元组成的实验室的门洞宽度不应小于1.2m,高度不应小于2.1m;有要求的房间的门洞尺寸应按具体情况确定,实验室的门扇应设观察窗。实验室缓冲间的面积一般为1300*(1300或1500)mm为宜,并且缓冲间的面积不能大于实验室房间面积的1/8。
单面布房小净宽不应小于1.3m,单走道双面布房小净宽不应小于1.6m,走廊地面有高差时,当高差不足二级踏步时,不得设置台阶,应设坡道,其坡度不宜大于1:8。靠两侧墙布置的边实验台之间的净距不应小于1.5m,当靠一侧墙改为布置拒或实验仪器设备时,其与另一侧实验台之间的净距不应小于1.8m,由一个标准单元组成的常规实验室;靠两侧墙布置的边实验台与房间中间布置的岛式或半岛式实验台之间的净距不应小于1.5m;布置实验仪器设备时,其与实验台之间的净距不应小于1.8m,实验台的端部与走道墙之间的净距不宜小于1.2m。
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PCR实验室院感管理:
1.进入各工作区域应当按照单一方向进行,即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区。
2.各区域的设备、清洁用具标记明确,不得混用。
3.各区域的衣服用不同颜色标记,离开各区域时不得将工作服带出。
4.试验台用移动式紫外线灯,高度60-90cm。扩增区延长照射时间,是过夜照射。同时各区域还需安装悬挂式紫外线灯管。
5.各试验区尽量避免不必要的走动和进出,减少交叉感染风险。
6.扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质,应特别注意实验人员的防护。
7.试剂储存和准备区:本区域对压力没有明确要求,储存试剂和用于标本制作的消耗品等材料应当直接运送至该区,不得经过其他区域;试剂盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在该区,应保存在标本处理区。
8.标本制备区:相对于临近区域应为正压,以避免临近区域进入本区的气溶胶污染。
9.扩增区:相对于临近区应为负压,为避免气溶胶所致的污染,应当尽量减少在本区域内的走动。必须注意的是,所有经过检测的反应管不得在此区域打开。
10.扩增产物分析区:相对于临近区域应为负压。本区域是主要的扩增产物来源,因此必须注意避免通过本区域扥物品带出。废液必须收集至1mol/L的HCl中,并且不能在实验室内倾倒,而应在远离实验室的地方倒掉。用过的吸头也必须放至1mol/L的HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序处理,如焚烧等。本区域需要配置高压锅用以灭活扩增后的标本。
小编还是要强调一下PCR实验室的终末,这涉及到医务人员的人身因此必需关注,关于PCR实验室的终末我们之前也有文章介绍不再赘述,但是还是得强调一下PCR实验室的终末:
PCR实验室环境分区清洁
清洁区:办公室和会议室等有窗户的区域若无明显污染,应每天定期开窗通风换气数次,湿式清洁桌面、台面和所有物体表面和地面至少1次。储物室、培养室和试剂配制室等无窗户的清洁区若无明显污染,每天早晨湿式清洁桌面、台面和地面至少1次。
半污染区:定期进行半污染区环境清洁,每天工作结束后,物体表面、地面和空气各清洁1次。
污染区:遇到污染情况随时,每天工作开始前及结束工作后,生物柜、实验室台面、地面和空气各1次,废弃标本和实验污物应分类进行处理;
注:有人条件下,不得使用化学剂进行容量喷雾和紫外线灯空气。
终末
目前PCR实验室开展核酸检测,仅靠人工进行物体表面和环境的耗费了大量的人力和时间,因此空气与物体表面联合,建议可以采用过氧化氢终末系统,实验研究结果显示采用过氧化氢蒸汽对微生物实验室空气进行时,H2O2 剂量为 7. 0 ml /m3和 10. 5 ml /m3 时 30 min 后,符合空气的要求; 对微生物实验室工作台面及墙面进行时,H2O2剂量 7. 0、10. 5 ml /m3 时, 30 min 后符合物体表面的要求。过氧化氢蒸汽对微生物实验室工作台面、墙面等物体表面及空气效果较好,可以作为微生物实验室的综合或终末方法使用。
干雾化过氧化氢可有效杀灭实验室内环境表面的微生物,设备自动化程度高和效果一致性好,适用于物体和环境的终末。由于其使用过氧化氢浓度较低、时间较短,可大大降低腐蚀或老化医疗设备的风险。
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风口的安装
1.安装系统新风口处的环境应清洁,新风口底部距室外地面应大于3m,新风口应低于排风口6m以上。当新风口、排风口在同侧同高度时,两风口水平距离不应小于10m,新风口应位于排风口上风侧。
2.新风处外端应有金属防虫滤网,并应便于清扫其上的积尘、积物。新风处应有挡雨措施,净通风面积应使通过风速在5m/s以内。
3.新风过滤装置的安装应便于更换过滤器、检查压差显示或报警装置。
4.回风口上的百叶叶片应竖向安装,宜为可关闭的,室内回风口有效通风面积应使通风速度在2m/s以内,走廊等场所在4m/s以内。当对噪声有较严要求时,上述速度应分别在1.5m/s以内和3m/s以内。
5.回风口的安装方式和位置应方便更换回风过滤器。
6.在回、排风口上安有过滤器的洁净室及生物*柜等装备,在安装前应用现场检漏装置对过滤器扫描检漏,并应确认无漏后安装。回、排风口安装后,对非零泄漏边框密封结构,应再对其边框扫描检漏,并应确认无漏;当无法对边框扫描检漏时,须进行生物学等专门评价。
7.当在回、排风口上安装动态气流密封排风装置时,应将正压接管与接嘴牢靠连接,压差表应安装于排风装置近旁目测高度处。排风装置中的过滤器应在装置外进行扫描检漏,并应确认无漏后再安入装置。
8.当回、排风口通过的空气含有高危险性生物气溶胶时,在改建洁净室拆装其回、排风过滤器前必须对风口进行消毒,工作人员人身应有防护措施。
9.当回、排风过滤器安装在夹墙内并安有扫描检漏装置时,夹墙内净宽不应小于0.6m。
